工業(yè)恒溫機(jī)依賴核酸序列的擴(kuò)增技術(shù) (NASBA)是在PCR基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新技術(shù)，是由1對帶有T7啟動子序列的引物引導(dǎo)的連續(xù)、等溫、基于酶反應(yīng)的核酸擴(kuò)增技術(shù)，反應(yīng)在41℃進(jìn)行，可以在2h左右將模板RNA擴(kuò)增約109倍，比常規(guī)PCR法高1000倍，不需特殊的儀器。

該技術(shù)一出現(xiàn)就被用于疾病的快速診斷和病人血清中HIV-1的定量檢測。盡管RNA的擴(kuò)增也可以使用反轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)（通過反轉(zhuǎn)錄形成單鏈DNA模板),NASBA相比則有自己的優(yōu)勢：可以在相對恒溫的條件下進(jìn)行（一般恒溫為41攝氏度）。,工業(yè)恒溫機(jī)該技術(shù)用于醫(yī)學(xué)診斷，相對傳統(tǒng)的PCR技術(shù)更為穩(wěn)定，準(zhǔn)確。

NASBA的優(yōu)勢：

（1）它的引物上帶有T7啟動子序列，而外來雙鏈DNA無T7啟動子序列，不可能被擴(kuò)增，因此該技術(shù)具有較高的特異性和靈敏度。

（2）NASBA將反轉(zhuǎn)錄過程直接合并到擴(kuò)增反應(yīng)中，縮短了反應(yīng)時間。

NASBA的劣勢：

（1）反應(yīng)成分比較復(fù)雜

（2）需要3種酶使得反應(yīng)成本較高

（3）對DNA病毒的檢測上NASBA就顯得不是那么適合

1998 年建立的滾環(huán)擴(kuò)增 (RCA) 是模擬自然界微生物環(huán)狀 DNA 的滾環(huán)復(fù)制過程，,工業(yè)恒溫機(jī)發(fā)展起來的一種放大信號和靶核酸相結(jié)合的檢測方法。在具有鏈置換活性的 DNA 聚合酶作用下由一條引物與環(huán)形 DNA 模板的鏈置換合成，實現(xiàn)環(huán)狀 DNA 模板的體外等溫線性擴(kuò)增。可分為線性擴(kuò)增 (單引物 RCA)、指數(shù)擴(kuò)增、多引物擴(kuò)增和信號擴(kuò)增RCA。

     工業(yè)恒溫機(jī)這種方法不僅可以直接擴(kuò)增DNA和RNA，還可以實現(xiàn)對靶核酸的信號放大，靈敏度達(dá)到一個拷貝的核酸分子，因此在核酸檢測中具有很大的應(yīng)用價值和潛力。

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